純化水微生物限度檢查是確保水質(zhì)安全的重要步驟，主要目的是確定水中微生物的數(shù)量和種類，以評(píng)估其是否符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和要求。下面小編就來(lái)介紹下純化水微生物限度檢查采用薄膜過(guò)濾法的操作流程。

　　純化水微生物限度檢查所需設(shè)備

　?。?）微生物限度檢測(cè)儀和培養(yǎng)箱、凈化工作臺(tái)。

　?。?）無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液：取磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鈉7.23g、氯化鈉4. 0g、蛋白胨1.0g，加水1000ml，微溫溶解，濾清，分裝，滅菌。

　　純化水微生物限度檢查分析步驟：

　　微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。檢驗(yàn)全過(guò)程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。細(xì)菌及控制菌培養(yǎng)溫度為30～35℃;霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度為23～28℃。

　　細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)

　　A 供試品檢查——薄膜過(guò)濾法

　　采用薄膜過(guò)濾法，濾膜孔徑應(yīng)不大于0.45μm，直徑一般為50mm，若采用其他直徑的濾膜，沖洗量應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整。選擇濾膜材質(zhì)時(shí)應(yīng)保證供試品及其溶劑不影響微生物的充分被截留。濾器及濾膜使用前應(yīng)采用適宜的方法滅菌。使用時(shí)，應(yīng)保證濾膜在過(guò)濾前后的完整性。水溶性供試液過(guò)濾前先將少量的沖洗液過(guò)濾以潤(rùn)濕濾膜。油類供試品，其濾膜和濾器在使用前應(yīng)充分干燥。為發(fā)揮濾膜的最大過(guò)濾效率，應(yīng)注意保持供試品溶液及沖洗液覆蓋整個(gè)濾膜表面。供試液經(jīng)薄膜過(guò)濾后，若需要用沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為100ml。總沖洗量不得超過(guò)1000ml，以避免濾膜上的微生物受損傷。 取相當(dāng)于每張濾膜含1ml的供試液，加至適量的稀釋劑中，用pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同“計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證”。沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)。每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。

　　B 陰性對(duì)照試驗(yàn) 取驗(yàn)用的稀釋液1ml，照上述薄膜過(guò)濾法操作，作為陰性對(duì)照。陰性對(duì)照不得有菌生長(zhǎng)。

　　C 培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

　　除另有規(guī)定外，細(xì)菌培養(yǎng)3天，霉菌、酵母菌培養(yǎng)5天，逐日觀察菌落生長(zhǎng)情況，點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，必要時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至7天進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)并報(bào)告。菌落蔓延生長(zhǎng)成片的平板不宜計(jì)數(shù)。點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)后，計(jì)算各稀釋級(jí)供試液的平均菌落數(shù)，按菌數(shù)報(bào)告規(guī)則報(bào)告菌數(shù)。若同稀釋級(jí)兩個(gè)平板的菌落平均數(shù)不小于15，則兩個(gè)平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。 一般營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用于細(xì)菌計(jì)數(shù);玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基用于霉菌及酵母菌計(jì)數(shù);酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基用于酵母菌計(jì)數(shù)。在特殊情況下，若營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上長(zhǎng)有霉菌和酵母菌、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基上長(zhǎng)有細(xì)菌，則應(yīng)分別點(diǎn)計(jì)霉菌和酵母菌、細(xì)菌菌落數(shù)。然后將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上的霉菌和酵母菌數(shù)或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)，與玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基中的霉菌和酵母菌數(shù)或營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中的細(xì)菌數(shù)進(jìn)行比較，以菌落數(shù)高的培養(yǎng)基中的菌數(shù)為計(jì)數(shù)結(jié)果。 細(xì)菌、霉菌和酵母菌總數(shù)每1ml不得過(guò)100個(gè)。

需要注意的是，在微生物檢測(cè)過(guò)程中，一些因素可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如，缺氧、污染源、物種種類等因素都可能影響樣品的真實(shí)性。因此，在檢測(cè)過(guò)程中要嚴(yán)格控制這些因素，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

總之，純化水微生物限度檢測(cè)是確保水質(zhì)安全的重要措施。通過(guò)遵循嚴(yán)格的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和操作程序，可以有效地保證純化水的質(zhì)量，從而保障其在各個(gè)領(lǐng)域的安全使用。